詞條
詞條說(shuō)明
? ? ??血漿游離DNA(cell-free DNA, cfDNA)是機(jī)體釋放到血漿中游離于細(xì)胞外的碎片化DNA片段,研究發(fā)現(xiàn)外周血cfDNA 水平的增加與許多臨床疾病(如組織損傷、炎癥、癌癥及妊娠等)的發(fā)生發(fā)展密切有關(guān)。cfDNA檢測(cè)與分析,是當(dāng)下醫(yī)學(xué)診斷方法中的一個(gè)重要領(lǐng)域,特別是**診斷和無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查等領(lǐng)域。游離DNA的質(zhì)量會(huì)直接影響下游應(yīng)用檢測(cè)結(jié)果
每個(gè)學(xué)生物的童鞋都有一個(gè)科研夢(mèng),一襲白大褂,一堆復(fù)雜的設(shè)備儀器,一間間敞亮的實(shí)驗(yàn)室。對(duì)于每一個(gè)即將進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的小萌新,都會(huì)興奮不已。不過(guò)先等等,我們是不是忘記了什么,那進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室首先要學(xué)會(huì)什么呢?是Qubit定量,還是PCR擴(kuò)增,亦或是RNA提取,no no no,都!不!是!歷史的經(jīng)驗(yàn)告訴我們,在實(shí)驗(yàn)室首先要學(xué)會(huì)的就是注意安全,保護(hù)好自己,也同樣保護(hù)好自己所在的實(shí)驗(yàn)室。所以在這總結(jié)了一些生物實(shí)驗(yàn)
? ? ?01 樣本切片? ? ?? ? ?石蠟樣本在提取前需要進(jìn)行切片處理,一般需要5-6個(gè)切片,一片鏡檢確定**細(xì)胞含量,其他進(jìn)行后續(xù)提取處理。切片的薄厚程度對(duì)后續(xù)觀察和提取會(huì)有一定影響。切片過(guò)厚不利于后續(xù)染色和組織學(xué)觀察,而且組織脫蠟和蛋白酶消化困難增加;切片過(guò)薄易造成DNA的機(jī)械損傷,同時(shí)切片總面積的
原理:1. DNA在NaCl溶液中的溶解度,是隨著NaCl的濃度的變化而改變的。當(dāng)NaCl的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L時(shí),DNA的溶解度較低。利用這一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2.DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。3.DNA遇二苯胺(沸水?。?huì)染成藍(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。準(zhǔn)
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