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許多生物學(xué)實驗都需要使用緩沖液來維持有效的pH,這很重要,因為蛋白質(zhì)和酶對pH的變化敏感,因此為當(dāng)前和下游實驗選擇正確的緩沖液至關(guān)重要。在本文中,我將簡要討論HEPES和PIPES在配置及使用過程中要考慮的一些重要因素,希望能對大家有所幫助。 如何制作HEPES及使用注意事項 HEPES是兩性離子Good's緩沖液,在6.8至8.2的pH范圍內(nèi)有效。這使HEPES在生理pH值下成為有效的緩沖液。該
TRIS-HCL緩沖液很穩(wěn)定,可被廣泛用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中的緩沖液的制備,它的生理體液的相容性好,與鈣,鎂離子不會形成沉淀,相反,磷酸鹽與鈣、鎂離子會產(chǎn)生沉淀。而且相同pH、相同濃度的TRIS-HCL緩沖液的離子強度比磷酸鹽緩沖液的離子強度低。這對酶類測定尤為重要。因為大離子強度易致有些酶失活。因此,有時用TRIS-HCL代替磷酸鹽緩沖液,效果更好。 但TRIS-HCL緩沖液的pH受溫度
近期了解到有實驗人員反應(yīng),作WB實驗有失敗的情況,懷疑與實驗中使用的緩沖劑有關(guān),可能是緩沖劑未滅菌或配制成溶液后感染了細(xì)菌導(dǎo)致的。那么WB實驗的失敗是否真的與緩沖劑染菌造成的呢? WB實驗即western blot蛋白質(zhì)印跡實驗,或稱為免疫印跡實驗,是將電泳分離后的細(xì)胞或組織中蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測技術(shù)。WB實驗失敗的原因有
說到抗凝劑很多人都不明白,到底是用來做什么的,簡單的來說抗凝劑就是防止血液凝固的化學(xué)制劑。在醫(yī)院用來采集血液做檢測的采血管中極為常用,在不同的血液檢測中,適用的抗凝劑也各有不同。常用的抗凝劑有EDTA、檸檬酸鈉、肝素等,下面我們來看一看,這幾種抗凝劑分別有什么作用機制。 因為血液凝固分為三個主要階段:第一,凝血酶原激活物形成;第二,凝血酶原激活物催化凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟?;第三,凝血酶催化纖維蛋白原
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